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新技术可以在高分辨率下快速成像突触蛋白

2019年10月11日 文章来源:网络整理 热度:151℃ 作者:刘英

我们的大脑包含数百万个突触-这些连接在神经元之间传递信息。在这些突触中有数百种不同的蛋白质,这些蛋白质的功能障碍会导致精神分裂症和自闭症等疾病。

新技术可以在高分辨率下快速成像突触蛋白

麻省理工学院以及哈佛大学和麻省理工学院的研究人员现在已经设计出一种新方法,可以以高分辨率快速成像这些突触蛋白。使用荧光核酸探针,它们可以标记和成像无限数量的不同蛋白质。他们在一项新研究中证明了这项技术,在这项研究中,他们对含有数千个突触的细胞样本中的12种蛋白质进行了成像。

多重成像很重要,因为即使在同一大脑内,突触与细胞之间也存在很大差异。您确实需要同时查看样本中的蛋白质,以了解不同突触的亚群是什么样,发现新型突触,并了解遗传变异如何影响它们。”

研究人员计划在下一步使用这种技术来研究突触在阻断与特定疾病相关基因的表达时会发生什么,以期希望开发出可以逆转这些效应的新疗法。

博德研究所斯坦利精神病学研究中心的转化研究主管Bathe和Jeff Cottrell是该研究的资深作者,该研究今天发表在《自然通讯》上。该论文的主要作者是前博士后Syuan-Ming Ming和Remi Veneziano,前研究生Simon Simon Gordonov,以及前研究科学家Li Li。

DNA成像

突触蛋白具有多种功能。它们中的许多有助于形成突触支架,这些支架与分泌神经递质和处理传入信号有关。虽然突触包含数百种这些蛋白质,但传统的荧光显微镜技术仅限于一次最多成像四个蛋白质。

为了增加这个数字,麻省理工学院的团队基于一种称为DNA PAINT的现有方法开发了一项新技术。使用最初由马克斯·普朗克生物化学研究所的拉尔夫·荣格曼(Ralf Jungmann)设计的这种方法,研究人员使用DNA抗体探针标记了蛋白质或其他感兴趣的分子。然后,他们通过传递与DNA抗体探针结合的荧光DNA“寡核苷酸”使每种蛋白质成像。

DNA链彼此之间固有的亲和力很低,因此它们会定期结合和解除结合,可以使用超高分辨率显微镜对闪烁的荧光进行成像。但是,对每种蛋白质进行成像大约需要半小时,因此无法对大型样品中的许多蛋白质进行成像。

Bathe和他的同事着手创建一种更快的方法,使他们可以在短时间内分析大量样本。为了实现这一目标,他们改变了DNA染料成像探针,使其可以使用所谓的锁定核酸与DNA抗体更紧密地结合。这样会产生更亮的信号,因此可以更快地完成成像,但分辨率略低。

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